概述

本產品/服務僅供科研使用

應用

使用前請先在去蛋白液RD和漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上標簽； 1.取新鮮菌絲加入液氮充分研磨； 2.向研磨好的粉末中迅速加入400μL緩衝液GPS和10μL RNase A（10mg/mL），迅速渦旋混勻後，將離心管放在65℃水浴15min，水浴過程中顛倒離心管以混合樣品數次。注意：若裂解後溶液粘稠，可以適量加大GPS使用量，同時在步驟3中增加緩衝液GPA的使用量，最終GPS和GPA的體積比為4：1； 3.加入100μL緩衝液GPA，渦旋振蕩1min，12,000rpm(13,400×g)離心5min，轉移上清至過濾柱CS中（過濾柱CS放在收集管中），然後12,000rpm(13,400×g)離心1min，轉移濾液至新的離心管中。注意：若裂解後溶液粘稠，加入緩衝液GPA渦旋混勻後將離心管置於冰上靜置5min，然後再離心； 4.加入等體積的無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現絮狀沉澱； 5.將上一步所得溶液和絮狀沉澱都轉移到RNase-Free吸附柱CR2中（吸附柱CR2放在收集管中），12,000rpm(13,400×g)離心1min，倒掉廢液，RNase-Free吸附柱CR2放入收集管中； 6.向RNase-Free吸附柱CR2中加入550μL去蛋白液RD（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm(13,400×g)離心1min，倒掉廢液，將RNase-Free吸附柱CR2放入收集管中； 7.向RNase-Free吸附柱CR2中加入700μL漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm(13,400×g)離心1min，倒掉廢液，將RNase-Free吸附柱CR2放入收集管中； 8.重複步驟7； 9.將RNase-Free吸附柱CR2放回收集管中，12,000rpm(13,400×g)離心2min，棄收集管，然後將RNase-Free吸附柱CR2轉移到新的離心管中，室溫晾幹5-10min。注意：乙醇殘留會抑製後續的酶反應，所以晾幹時要確保乙醇揮發幹淨。但也不要幹燥太長時間，以免難以洗脫DNA； 10.在RNase-Free吸附柱CR2中加入50-100μL洗脫緩衝液TB，室溫放置3-5min，12,000rpm(13,400×g)離心2min，將溶液收集到離心管中；

屬性

培養基	馬鈴薯浸粉：10.0，葡萄糖：20.0，KH2PO4：3.0，MgSO4·7H2O：1.5，硫胺素：0.008，瓊脂：15.0，pH：6.0±0.2（25℃）
存儲形式	凍幹粉